بررسی خصوصيات پاسخ شوک حرارتی در بروسلاملی‌تنسيس و واکنش پروتئين شوک حرارتی با سرم افراد بيمار و کنترل

مظفری, نورامیر and قاضی, فریده and مصطفی‌زاده, امراله and مصطفائی, علی and رجب‌نيا, رمضان (2008) بررسی خصوصيات پاسخ شوک حرارتی در بروسلاملی‌تنسيس و واکنش پروتئين شوک حرارتی با سرم افراد بيمار و کنترل. مجله علوم پزشکی رازی, 15 (58). pp. 39-48. ISSN 2228-7051

Preview

Text RJMS-v15n58p39-fa.pdf Download (306kB) | Preview

Abstract

زمينه و هدف: بروسلوز، يکی از مهمترين بيماريهای مشترک بين انسان و دام است که بر اثر آلودگی با باکتری‌های جنس بروسلا(بخصوص بروسلاملی‌تنسيس) به وجود می‌آيد. وقتی بروسلا در معرض افزايش درجه حرارت قرار می‌گيرد، پروتئين‌های شوک حرارتی سنتز می‌کند. در اين مطالعه، بروسلاملی‌تنسيس تحت شوک حرارتی در حرارتهای مختلف قرار می‌گيرد که تحت اين شوک‌ها، (hsp)Heat Shock Proteinها سنتز می‌شوند. سپس با استفاده از روش SDS-PAGE، الگوی سنتز hspها بررسی می‌شود. با استفاده از روش وسترن بلات، ايمونوژنيسيته hsp(hsp60) در مقابل سرم انسان بيمار و کنترل، مورد بررسی قرار می‌گيرد. هدف از اين پژوهش، بررسی خصوصيات پاسخ شوک حرارتی در بروسلاملی‌تنسيس پس از شوک در حرارتهای مختلف است. روش بررسی: اين مطالعه از نوع توصيفی تحليلی می‌باشد. 5 باکتری بروسلاملی‌تنسيس از انسان جدا شد. سپس باکتری‌ها تحت شوک‌های حرارتی در 39، 40 و 42 درجه سلسيوس قرار گرفتند. استخراج پروتئين‌های بروسلا با سديم دود سيل سولفات و ليزوزيم انجام شد. الکتروفورز در ژل پلی‌اکريل‌آميد در حضور سديم دود سيل سولفات(SDS-PAGE) براساس روش لامی با بعضی تغييرات انجام گرفت. در نهايت با استفاده از روش وسترن‌بلات، ايمونوژنيسيته hsp(hsp60) در مقابل سرم انسان بيمار(مبتلا به بروسلوز) و کنترل مورد بررسی قرار گرفت. يافته‌ها: نتايج SDS-PAGE نشان داد که باندهای پروتئينی در محدوده وزنی 100-10 کيلودالتون قرار داشتند. عمده‌ترين باندهای پروتئينی، در محدوده وزنی 75-45 و 30-20 و 20-14 کيلودالتون قرار دارند. در باکتری‌های کنترل در محدوده 60 کيلودالتون، باندی مشاهده می‌شود که hsp60 می‌باشد که در حالت طبيعی(کنترل) مقدار آنها کم بود ولی در باکتری‌های شوک ديده، مقدار توليد آنها افزايش قابل چشمگيری داشته است. در واکنش پروتئين‌های پيکره بروسلاملی‌تنسيس شوک ديده با سرم افراد بيمار با وسترن بلات، چندين باند پروتئينی ديده می‌شود که در واکنش با سرم افراد کنترل، ديده نمی‌شود و در محدوده 10، 60 و 100 کيلودالتون می‌باشد. در واکنش پروتئين‌های پيکره بروسلاملی‌تنسيس شوک نديده با سرم افراد بيمار، چندين باند پروتئينی ديده می‌شود که در واکنش پروتئين‌های با سرم افراد کنترل ديده نمی‌شود. نکته قابل توجه در واکنش پروتئين‌های پيکره بروسلاملی‌تنسيس شوک ديده با سرم افراد بيمار، وجود باند در ناحيه 60 کيلودالتونی در تمام نمونه‌هاست که اين باند در واکنش پروتئين‌های پيکره بروسلاملی‌تنسيس شوک نديده با سرم افراد بيمار، در بعضی نمونه‌ها ديده نمی‌شود يا ضعيف‌تر می‌باشد. در شوک‌های حرارتی 40 و 39 درجه سلسيوس، اختلافی در باندهای پروتئينی در SDS-PAGE در مقايسه با کنترل مشاهده نشده است. نتيجه‌گيری: نتايج بدست آمده در SDS-PAGE و وسترن بلاتينگ پروتئين‌های باکتری شوک ديده با سرم افراد بيمار و کنترل، نشان‌دهنده افزايش سطح توليد hspها در شرايط شوک و ايمونوژن بودن آنها به خصوص hsp60 می‌باشد و بيانگر واکنش سرولوژيک بدن انسان در مقابل hsp60 می‌باشد. احتمالاً می‌توان از hsp60 به عنوان آنتی‌ژن در تست الايزا يا در طراحی واکسن‌‌های زيرواحد استفاده کرد.

Item Type:	Article
Uncontrolled Keywords:	بروسلاملی‌تنسيس،شوک حرارتی،پروتئين
Subjects:	R Medicine > R Medicine (General)
Divisions:	Other Journal > Razi Journal of Medical Sciences
Depositing User:	Touba Derakhshande
Date Deposited:	18 Nov 2014 09:58
Last Modified:	18 Nov 2014 09:58
URI:	http://eprints.bpums.ac.ir/id/eprint/1722

Actions (login required)

View Item