بررسی مولکولی فعاليت پروتئوليتيکی پروتئين 3C در پاراکو ويروس انسانی تيپ يک

قاضی, فریده and گرزين, علی‌اکبر and شمس شهرآبادی, محمود and دبيرمنش, بهاره (2007) بررسی مولکولی فعاليت پروتئوليتيکی پروتئين 3C در پاراکو ويروس انسانی تيپ يک. مجله علوم پزشکی رازی, 14 (55). pp. 159-166. ISSN 2228-7051

Preview

Text RJMS-v14n55p159-fa.pdf Download (235kB) | Preview

Abstract

زمينه و هدف: پاراکوويروس‌های انسانی، جزء خانواده پيکورنا ويروس‌ها می‌باشند که از نظر کلينيکی حائز اهميت هستند. اخيراً بررسی توالی ژنوم پاراکوويروس تيپ يک نشان داده است که اين ويروس، از پيکورنا ويروس‌های ديگر متفاوت بوده و فاقد موتيفی است که در فعاليت پروتئازی 2A دخالت دارد. هدف از انجام اين مطالعه، بررسی فعاليت پروتئوليتيکی پروتئين 3C در پاراکو ويروس انسانی تيپ يک می‌باشد. روش بررسی: اين مطالعه از نوع بنيادی کاربردی می‌باشد. ناحيه کد کننده پروتئين 3C از cDNA(Complementary DNA) تهيه شده از ژنوم پاراکو ويروس انسانی تيپ يک، با آنزيم ليگاز در پلاسميد pUBS(Expression plasmid vector) وارد شد و پلاسميد نوترکيب pFG3(Plasmid Farideh Ghazi) تهيه گرديد. پس از انتقال پلاسميد و تکثير آن در باکتری E.coli MC10.22، به طريق استخراج با فنل، DNA جدا شد و سپس در سيستم پروکاريوتی(E.coli BL21) و روش درون لوله‌ای(In vitro)، تحت پروموتور T7 بيان گرديد. نتايج با SDS-PAGE(Sodium dodecyl sulfate-Polyacrylamid gel electrophoresis) بررسی شد. يافته‌ها: با بررسی محصول بيان پلاسميد نوترکيب فاقد ژن 3C در هر دو سيستم پروکاريوتی و In vitro، فقط يک باند بزرگ در حدود 90 کيلو دالتون مشاهده گرديد. در صورتی که وقتی محصول بيان پلاسميد نوترکيب حاوی 3C در هر دو سيستم توسط پلی‌آکريل آميد ژل بررسی شد، بجای يک باند بزرگ، چندين باند کوچک مشاهده شد که دلالت بر خاصيت پروتئازی پروتئين 3C می‌کند. در ضمن وقتی آنتی‌پروتئاز به محصول پلاسميد حاوی ژن 3C اضافه گرديد، نتيجه، مشابه محصولات حاصل از بيان پلاسميد فاقد ژن 3C بود. نتيجه‌گيری: نتايج نشان داد که پاراکوويروس‌های انسانی تيپ يک، از نظر فعاليت پروتئوليتيکی، متفاوت از ديگر پيکورنا ويروس‌ها می‌باشند و در اين ويروس‌ها، فقط پروتئين 3C دارای خاصيت پروتئازی بوده و کليه کليواژهای پلی پروتئين اوليه ويروس توسط اين پروتئاز انجام می‌شود.

Item Type:	Article
Uncontrolled Keywords:	پيکورنا ويروس‌ها، پاراکو ويروس‌های انسانی، پروتئاز 3C ،بيان ژن
Subjects:	R Medicine > R Medicine (General)
Divisions:	Other Journal > Razi Journal of Medical Sciences
Depositing User:	Touba Derakhshande
Date Deposited:	27 Nov 2014 14:56
Last Modified:	27 Nov 2014 14:56
URI:	http://eprints.bpums.ac.ir/id/eprint/1863

Actions (login required)

View Item