تهيه و خالص‌سازی آنتی‌ژن‌های کرم بالغ فاسيولاهپاتيکا جهت تشخيص فاسيوليازيس

ملکی, فاطمه and صادق‌حسنی, صفورا (2007) تهيه و خالص‌سازی آنتی‌ژن‌های کرم بالغ فاسيولاهپاتيکا جهت تشخيص فاسيوليازيس. مجله علوم پزشکی رازی, 14 (54). pp. 157-166. ISSN 2228-7051

[img]
Preview
Text
RJMS-v14n54p157-fa.pdf

Download (534kB) | Preview
Official URL: http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_id=713&sid=1&s...

Abstract

زمينه و هدف: فاسيوليازيس، يکی از بيماری‌های مهم انگلی انسان و دام است که توسط گونه‌های فاسيولا در ميزبان ايجاد می‌شود. تقريباً 4/2 ميليون نفر در جهان به اين انگل مبتلا هستند و 180 ميليون نفر، در معرض خطر ابتلا هستند. تشخيص بموقع و درمان سريع آن، از بروز عوارض بيماری در مبتلايان بطور چشمگيری جلوگيری می‌نمايد. به همين جهت در مطالعه حاضر نسبت به جداسازی، خالص‌سازی و ارزيابی آنتی‌ژن مناسب و بکارگيری آن در روشهای سرولوژيک حساس و اختصاصی اقدام شد. روش بررسی: در اين مطالعــه، ابتدا کرمهای سالم جمع‌آوری شدند، سپس کوتيکول و ساير ارگان‌های آنها تفکيک شده، آنگاه به صورت جداگانه، هموژنيزه وسونيکه شدند. ميزان پروتئين آنها به روش برادفورد اندازه‌گيری شده و کليه نمونه‌ها، تغليظ شدند و بر روی ستــون ژل کروماتوگرافی(سفادکس G200) بــرده شدنــد. برای هر قسمت، 4 جزء آنتی‌ژنيک دريافت شد. آنگاه با اولترافيلتراسيــون پروتئيــن، نمونه‌ها به ميــزان مناسب رسانــده شدنــد. با آنتی‌ژن بدست آمده، 36 راس خرگوش مصون شدند، آنتی سرم بدست آمده از خرگوش‌ها به همراه 30 نمونه سرم انسان مشکوک به ابتلاء به فاسيوليازيس، به روش CIEP(Counterimmuno-electrophoresis) آزمايش شدند. در اين مطالعه، آنتی‌ژن جزء 2(Fraction 2) کوتيکول فاسيولا هپاتيکا، حساسيــت 9/90% و اختصاصيــت 4/94% را در تســت CIEP نشــان داد. آنگاه آنتی‌ژن مذکور با روش SDS-PAGE(sodium dodecyl sulphate-polyacryl amide) شناسايی شد که تنها يک باند مشخص 60 کيلودالتونی داشت؛ در طول ژل، باند ديگری مشخص نگرديد؛ اين آنتی‌ژن، با روش الايزا مورد آزمايش قرار گرفت. در اين روش، آنتی‌بادی در نمونه سرم 26 نفر از 30 انسان و همه 36 راس خرگوش، قابل تشخيص و اندازه‌گيری بود. نوع مطالعه، راه‌اندازی يک روش يا سيستم علمی بود که تجزيه و تحليل اطلاعات آن با استفاده از آزمون همبستگی به روشspss انجام شد. يافته‌ها: در مجموع با روش CIEP، از مجموع 66 نمونه سرم(30 نمونه سرم انسان و 36 نمونه سرم خرگوش)، در 60 مورد (آنتی‌ژن حاصل از کوتيکول فاسيولا هپاتيکا) واکنش رسوبی مثبت مشاهده گرديد، در حالی که با روش الايزا، 62 نمونه سرم از 66 نمونه، جواب مثبت داشته است. نتيجه‌گيری: بنابراين استفاده از آنتی‌ژن 60 کيلودالتونی کوتيکول کرم فاسيولا به عنوان آنتی‌ژن خالص، در تستهای سرولوژيک CIEP والايزا توصيه می‌شود. نتايج حاصل، بيانگر حساسيت بالای روش الايزا نسبت به روش CIEP می‌باشد.

Item Type: Article
Uncontrolled Keywords: خالص‌سازی ، آنتی‌ژن، فاسيولا هپاتيکا،فاسيوليازيس
Subjects: R Medicine > R Medicine (General)
Divisions: Other Journal > Razi Journal of Medical Sciences
Depositing User: Touba Derakhshande
Date Deposited: 27 Nov 2014 15:17
Last Modified: 27 Nov 2014 15:17
URI: http://eprints.bpums.ac.ir/id/eprint/1918

Actions (login required)

View Item View Item