القاء پاسخ ايمنی هومورال عليه ويروس هرپس سيمپلکس تيپ يک با به کار گيری گليکوپروتئين نوترکيب D ويروس در موش های BALB/C

سلیمان جاهی, حوریه and روستایی, محمد حسن and رسایی, محمد جواد and کاظم نژاد, انوشیروان and مشکات, زهرا and زندی, کیوان (2003) القاء پاسخ ايمنی هومورال عليه ويروس هرپس سيمپلکس تيپ يک با به کار گيری گليکوپروتئين نوترکيب D ويروس در موش های BALB/C. مجله علمی پژوهشی طب جنوب, 7 (1). pp. 1-10. ISSN 1735-4374

[img]
Preview
Text
BPUMS-v7n1p1-fa.pdf

Download (1MB) | Preview
Official URL: http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_id=77&sid=1&s...

Abstract

يکی از مهمترين گليکو پروتئين های سطحی ويروس هرپس سيمپلکس تيپ يک (HSV-1)، گليکو پروتئينD (gpD) است که با داشتن ويژگی آنتی ژنيسيتی و ايميونوژنيسيتی بالا, باعث القاء پاسخ ايمنی در بدن ميزبان می شود. با توجه به شباهت زيادی که بين زنجير نوکلئوتيدهای ژن کد کننده gpD بين اين ويروس و ويروس هرپس سيمپلکس تيپ 2 (HSV-2) وجود دارد، بنابر اين کانديدای مناسبی برای توليد واکسن ريکامبيننت محسوب می شود. در اين پژوهش برای توليد gpD نوترکيب ابتدا با کيولوويروس حاوی ژن کامل gpD در ياخته هايSf9 (Spodoptera frugiperda) تکثير داده و 4-5 روز پس از انکوباسيون، ياخته های آلوده جمع آوری وتحت عمل سونيکاسيون قرار گرفت. پس از اندازه گيری مقدار پروتئين موجود در شيرابه سلولی، در کنار شيرابه حاصل از ياخته های شاهد SDS-PAGE و آنگاه با محلول کوماسی بلو رنگ آميزی و الگوی الکتروفورز پروتئين ها تعيين شد. در مرحله بعد با انتقال پروتئين های الکتروفورز شده از روی ژل به کاغذ نيتروسلولز و با استفاده از به ترتيب آنتی بادی پلی کلونال اختصاصی، آنتی بادی ضد ايمنوگلوبولين های انسان نشاندار، و سوبسترای مناسب روش وسترن بلاتينگ انجام و صحت وجود gpD نوترکيب تأييد شد. به منظور بررسی ويژگی ايمن زايی gpD نوترکيب توليدی اقدام به تزريق داخل عضلانی به يک گروه 7 تايی از موش های BALB/c سه هفته ای شد. ضمناً همين تعداد موش نيز برای گروه شاهد و گروه ويروس که به ترتيب با PBS و ويروس حاد مورد تلقيح قرار گرفته بودند, مورد استفاده قرار گرفت. جمعاً 3 تزريق با فواصل 21 روز انجام شد و 21 روز بعد از آخرين تزريق از تمام موش ها خونگيری به عمل آمد. آزمايش خنثی سازی ويروس حاد با استفاده از سرم خون موش های گروههای سه گانه انجام شد و نتايج نشان داد که gpD نوترکيب توانسته بود تا در موش های تزريق شده باعث ايجاد آنتی بادی های خنثی کننده ويروس هرپس سيمپلکس تيپ يک شود.

Item Type: Article
Uncontrolled Keywords: گليکوپروتئين D، ايمنوژنيسيتی، هرپس سيمپلکس تيپ يک با کيولوويروس، تست خنثی سازی ويروس،
Subjects: R Medicine > R Medicine (General)
Divisions: Research Center > The Persian Gulf Tropical Medicine Research Center
Depositing User: سمیه باغبانی
Date Deposited: 17 Aug 2014 08:34
Last Modified: 17 Aug 2014 08:34
URI: http://eprints.bpums.ac.ir/id/eprint/438

Actions (login required)

View Item View Item