ساخت وکتور ريپورتر القايی لوسيفراز برای رديابی فعاليت ويروس HTLV-1

فتاحی عبدی زاده, مجتبی and مکوندی, منوچهر and سمر باف زاده, علیرضا and لطيف نيا, مریم and آزادمنش, کیهان (2013) ساخت وکتور ريپورتر القايی لوسيفراز برای رديابی فعاليت ويروس HTLV-1. مجله علوم پزشکی رازی, 20 (113). pp. 60-67. ISSN 2228-7051

Preview

Text RJMS-v20n113p60-fa.pdf Download (580kB) | Preview

Abstract

زمينه و هدف: ويروس HTLV-1 ((Human T_cell lymphotropic virus type با حدود 20 ميليون نفر آلوده در جهان يک مشکل بهداشت جهانی است که در مناطقی مثل ژاپن و خراسان ايران اندميک است. اين ويروس عامل بيماری پيشرونده لوسمی سلول های T بزرگسالان (ATL) می‌باشد که دارويی تائيد شده موثر بر عليه آن تاکنون وجود ندارد. به دليل خصوصيات غير سيتوليتيکی و انتقال سلول به سلول اين ويروس، مطالعات دارويي در کشت سلولی بر روی اين ويروس با روش های معمول در آزمايشگاه In vitro )) کم بوده و منحصر به چند رده سلولی آلوده به آن می‌باشد .بنابراين ساخت وکتور ريپورتر برای ارزيابی عفونت ويروس HTLV1 در کشت سلولی به جهت مطالعات دارويی ضروری به نظر می رسد. ريپورتر های ساخته شده برای رتروويروس ها معمولاً بر اساس ترانس اکتيويشن ناحيه LTR می باشد. ناحيه LTR در ژنوم ويروس شامل پروموترويروس است که در تکثيرو نسخه برداري آن، تحت تاثير پروتئين ويروسی Tax نقش دارد. روش کار: منطقه پروموتری LTR ويروس با استفاده از آنزيم محدود کننده از پلاسميد pUCLTR-Lacz بريده و در وکتور بدون پروموتر pGL4.17 که حامل ژن ريپورتر لوسيفراز است در بالادست ژن لوسيفرازساب کلون شد. ابتدا کلونينگ با colony PCR، هضم آنزيمی وتعيين توالی تاييد شد. سپس سلول T293 باوکتور نوترکيب ترانسفکت شد وبيان القايی لوسيفراز مورد تاييد قرار گرفت. يافته‌ها: وکتور نوترکيب توليد شده درسلول T293 پس از کوترانسفکت با وکتور بيانیTax باعث بيان قابل ملاحظه ی لوسيفراز تا 50 برابر درسلول‌های مورد آزمايش نسبت به کنترل شد. نتيجه‌گيری: با توجه به قابليت بالای وکتور نوترکيب توليد شده، می تواند درمطالعات بعدی درساخت رده سلولی نشانگر برای ويروس HTLV-1، به جهت مطالعات پايه ای و دارويی به کار رود. واژه‌های کلیدی: لوسیفراز، وکتور ریپورتر، HTLV-1.،

Item Type:	Article
Subjects:	R Medicine > R Medicine (General)
Divisions:	Other Journal > Razi Journal of Medical Sciences
Depositing User:	Touba Derakhshande
Date Deposited:	24 Aug 2014 06:26
Last Modified:	24 Aug 2014 06:26
URI:	http://eprints.bpums.ac.ir/id/eprint/657

Actions (login required)

View Item